缓冲液的作用原理（什么叫缓冲溶液?什么是缓冲作用）
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添加时间：2022-11-25 浏览次数:1687
PCR是体外合成双链DNA的一种方法，类似于DNA片段复制扩增，其特异性主要来源于特异性引物和特异性DNA聚合酶（Taq酶）。
试剂准备一般为：DNA模板、特异性引物、dNTP、PCR Buffe、Taq酶。按照试剂盒和说明书配制反应体系和设置扩增程序，反应结束电泳鉴定。
实验室常用的Tris系列缓冲液：三羟甲基氨基甲烷（Tris）是一种应用广泛的有机物，化学式为C4H11N03,白色结晶颗粒。Tris及其衍生物常用于生化实验中缓冲液的制备，尤其是核酸和蛋白质相关的实验中都需要用到它作为生物缓冲剂。作为弱碱性的缓冲试剂在配制大范围PH值的缓冲液中有很大的优势，并且不与Ca、Mg离子等重金属离子反应发生沉淀，对实验结果的干扰很小。
Tris系列缓冲液包括：TBS缓冲液、TBST缓冲液、TE缓冲液、TAE缓冲液、TBE缓冲液。今天主要介绍TE缓冲液和TAE缓冲液。
TE缓冲液：是Tris-HCL缓冲液+EDTA,一般用作溶解剂或保持剂，对DNA的碱基有保护作用，被用于DNA的稳定和储存。
TAE缓冲液：是使用最广泛的缓冲液系统，双链DNA在其中的迁移率较快，回收DNA片段时经常用TAE系统进行电泳。
常规的TAE缓冲试剂一般为瓶装的50×TAE浓缩液，每次使用时需要配成1×的来使用，而且运输途中保存较困难，影响液体的稳定性。
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